左图：《蒙娜丽莎》第三层：《丽莎·格拉迪尼肖像》；右图：《蒙娜丽莎》第四层（即直接可见层）

2014年，法国科学家、时光科技联合创始人帕斯卡尔·科特历经十年的研究，借助于独创的240兆像素多光谱扫描技术和分层放大技术，发现《蒙娜丽莎》一共叠加了四层图像。除去最下面的两层草稿层，在我们所看到的女子之下还隐藏着一位长相略有不同、梳着当时流行发束的年轻女子，科特将其称为《丽莎·格拉迪尼肖像》。后来，达·芬奇通过在头部和身上巧妙地覆盖一层面纱，遮盖了原有的衣着和发饰，同时也混入了别的模特的形象，甚至将复杂、精致的发束打乱，加入了图像学的隐喻：披散的头发唤起了人们对贞洁、自守等理想中女性品德的美好记忆。除此之外，科特还发现《蒙娜丽莎》原本是有眉毛和睫毛的，只不过由于后期修复不当消失了。